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吖啶酯DMAE-NHS的哪些特性佰圣特带你了解更多
发布日期: 2021-08-13
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       吖啶酯DMAE-NHS的发光动力学,吖啶酯DMAE-NHS的发光为闪光,0.4s时发光强度达到zui大,前2s钟内发光强度下降很快,此后下降比较慢,发光半衰期约为0.9s。DMAE-NHS的发光动力学性质不受DMAE-NHS浓度的影响,改变DMAE-NHS浓度只影响发光强度的大小,但不影响其达到zui大发光强度的时间和半衰期。
      吖啶酯DMAE-NHS的发光强度DMAE-NHS的动力学检测范围为1.25×10-11~1.25x10-17mol,发光强度为6.11×1018cps/mol或1.03×107cps/ng。用DMAE-NHS标记TSH单克隆抗体,DMAE-NHS与Ab的分子比为2.4的情况下,实验测得DMAE-NHS-Ab的发光强度为1.8×1019cps/molAb或1.125×105cps/ngAb。DMAE-NHS-Ab的动力学检测范围为1.0×10-12~1.0×10-18mol。
      发光启动试剂对DMAE-NHS发光强度的影响吖啶酯发光通常采用的发光启动试剂有三种配方:二种物质的配方是H2O2和NaOH;三种物质的配方是HNO3(有些用HCL代替)、H2O2和NaOH;四种物质的配方为除上述三种物质外还加入一种表面活性剂。如CTAC、TritonX-100、Tween-20等以增强发光。
      发光启动试剂使用的HNO3,H2O2,和NaOH的浓度和体积不同,DMAE-NHS发光强度不同,采用如下组成时发光强度zui大,即(1)100μl0.1mol/LHNO3+0.1%H2O2(2)100μl0.25mol/LNaOH。
      加入表面活性剂能增大DMAE-NHS的发光强度,试验了三种表面活性剂∶CTAC,TritonX-100,Tween-20对DMAE-NHS的发光强度的影响,2%TritonX-100的增强的效果量好,吖啶酯能使DMAE-NHIS的发光强度增大4.5倍,2%Tween-20和0.2%CTAC使DMAE-NHS的发光强度分别增大3.5和2.8倍。加入TritonX-100或Tween-20能增加DMAE-NHS的发光强度而不引起本底增加,但加入CTAC时引起本底增加很多,故不宜使用CTAC做增强剂。
     吖啶酯DMAE-NHS的热稳,定性DMAE-NHS的热稳定性随pH值增大和温度升高而降低,室温(20℃)下,DMAE-NHS在pH为5.8,7.0,8.0的PB缓冲液中均较稳定,16天后发光活性分别降低1.6%、3.6%和8.3%。37℃下,DMAE-NHS在pH为5.8,7.0,8.0的水溶液中,经过16天后的发光活性分别降低8.9%、22%和42%。
     吖啶酯DMAE-NHS的水解性,DMAE-NHS在水溶液中的发光活性随时间而降低的原因是因为发生水解,在碱性环境中有利于水解,升高温度也有利于水解,即DMAE-NHIS的水解速度随溶液pH值增大和温度升高而加快。在4℃或冰冻条件下,DMAE-NHS在pH为7.0的0.1mol/L PB缓冲液中稳定,保存半年后,其发光活性没有下降。
    吖啶酯DMAE-NHS的优势,吖啶酯DMAE-NHS与传统吖啶酯相比,发光效率更高,热稳定性更好,亲水性更强一些,该化学发光试剂光量子产率高、背景低,与蛋白、抗原,抗体等偶合后,发光效率几乎不受影响,从而成为优良的化学发光免疫分析标记试剂。
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