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佰圣特分析吖啶酯及吖淀酰胺类不同的特点
发布日期: 2021-09-29
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       佰圣特分析吖啶酯及吖淀酰胺类不同的特点,这类化合物从发光的机理来说, 特点是: 发光反应中在形成电子激发态中间体之前, 联结于吖啶环上的不发光的取代基部分从吖啶环上脱离开来, 即未发光部分与发光部分分离, 因而其发光效率基本不受取代基结构的影响。吖啶酯和吖啶酰胺在酸性溶液中(pH 小于4. 8) 都很稳定, 该类化合物及其与蛋白的偶联物在室温下保存4 周, 其光量子产率不降低; 冻干品在- 20 ℃下, 可保存一年以上。但当pH 大于4. 8(尤其是在碱性溶液中) ,吖啶酯和吖啶酰胺类化合物由于发生部分水解而降低其稳定性, 水解机理。在水溶液中当其受到OH- 进攻时生成一假碱, 假碱继续在OH- 作用下酯键断裂, 最后生成N - 甲基吖啶酮, 水解过程为不发光的暗反应过程。
    吖啶类化合物在水溶液中的水解程度, 随pH值增大而增大;随温度升高而增大。大多数吖啶酰胺类化合物的稳定性较吖啶酯类高, 其原因是由于C - N 键与C - O 键的键级不同,C - N 键大于C- O 键; 吖啶酰胺类化合物抵抗水解的能力强于吖啶酯类。对于吖啶化合物来说, 吖啶环及酚环或苯磺酰环上, 不连取代基与连接不同取代基其稳定性不同。通常吖啶环或酚环或苯磺酰环上,连有甲基等取代基的吖啶酯或吖啶磺酰胺, 由于空间位阻大的原因热稳定性增加, 连有吸电子基团时, 因有利于亲核取代反应而使稳定性降低。吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物化学发光不需要催化剂, 在有H2O2 的稀碱性溶液中即能发光,具有许多优越性, 特别是无须一个催化过程, 也不需要增强剂, 从而降低了背景发光, 提高了信噪比, 干扰作用少。
 
       该类化合物作为化学发光免疫分析的发光标记物, 还具有其它方面的优点,如光释放快速集中、发光效率高、发光强度大, 易于与蛋白质联结且联结后光子产率不减少、标记物稳定, 在2 - 8 ℃下可保存数月之久, 因此吖啶酯或吖啶磺酰胺是一类非常有效的化学发光标记物。这类化合物发光为闪光型, 加入发光启动试剂后,0. 4s 左右发射光强度达到最大, 半衰期为0. 9s 左右。吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物应用于CLIA ,通常采用的体系是Acridinium ester/ H2O2 系统, 即用吖啶酯或吖啶磺酰胺标记抗体或抗原, 用HNO3+ H2O2 和NaOH 作发光启动试剂。
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